Sumber belajar merupakan komponen yang penting dalam pembelajaran, karena dapat memberikan pengalaman belajar bagi para peserta didik. Kurangnya sumber belajar mengakibatkan proses belajar tidak dapat berjalan dengan lancar. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kelayakan buku identifikasi vertebrata koleksi kebun binatang Mangkang sebagai sumber belajar dalam pembelajaran biologi materi animalia kelas X SMA/MA. Penelitian ini menggunakan metode Research and Development (R&D) dari Sugiyono (2015) dengan 10 tahap. Tahapan tersebut adalah identifikasi potensi dan masalah, pengumpulan data, desain produk, validasi produk, revisi desain, uji coba produk, revisi produk, uji coba pemakaian, revisi produk, dan produk akhir. Hasil penilaian kelayakan dari para ahli menunjukkan kriteria sangat layak digunakan sebagai sumber belajar dengan presentase 89% dari ahli materi, 85% dari ahli media, 84% dari guru Biologi MA NU 03 Sunan Katong, 86% dari nilai rata-rata validator dan 84% dari tanggapan siswa menggunakan buku identifikasi vertebrata. Dan keberfungsian sumber belajar terhadap hasil belajar yang dinyatakan efektif berdasarkan uji-t (thitung > ttabel) / 3,734 > 2,007 dengan n-gain = 0,51.