Gracilaria verrucosa (Hudson) Papenfuss merupakan salah satu komoditas penting dalam industri akuakultur, terutama sebagai bahan pembuat agar-agar. Laju pertumbuhan Gracilaria verrucosa (Hudson) Papenfuss dipengaruhi oleh berbagai faktor, termasuk dari media kultur yang digunakan. Penelitian ini bertujuan untuk membandingkan laju pertumbuhan Gracilaria verrucosa (Hudson) Papenfuss isolat Jepara pada tiga jenis media kultur yang berbeda, yaitu Walne, Provasoli’s Enriched Seawater (PES), dan Conway. Penelitian ini menggunakan metode eksperimental dengan perlakuan tiga jenis media kultur dan tiga ulangan dengan kondisi lingkungan yang dikontrol stabil pada suhu 21oC -23 oC, pH 6-9, salinitas 28 ppt, dan intensitas cahaya pada 1.374-1.388 lux. Hasil penelitian menunjukkan bahwa media kultur memberikan pengaruh yang signifikan (p < 0,05) terhadap laju pertumbuhan Gracilaria verrucosa (Hudson) Papenfuss isolat Jepara dengan data bobot memiliki nilai (sig = 0,00) dan data panjang (sig = 0,001). Media PES memberikan hasil pertumbuhan tertinggi secara statistik, diikuti Conway yang juga menunjukkan pertumbuhan cukup baik namun masih di bawah PES. Sementara Walne menghasilkan pertumbuhan terendah. Perbedaan ini diduga dipengaruhi oleh komposisi nutrien, khususnya keseimbangan nitrat dan fosfat. Media PES direkomendasikan sebagai media kultur paling optimal untuk budidaya Gracilaria verrucosa (Hudson) Papenfuss.