Serangan hama Helicoverpa armigera merupakan salah satu penyebab utama penurunan produksi tanaman jagung di Indonesia. Penggunaan insektisida kimia yang berlebihan menimbulkan dampak negatif, sehingga diperlukan alternatif pengendalian yang lebih ramah lingkungan, salah satunya dengan menggunakan agen biokontrol hayati seperti Bacillus thuringiensis (Bt). Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efektivitas Bacillus thuringiensis isolat BT-RG01 sebagai agen biokontrol terhadap Helicoverpa armigera pada tanaman jagung, serta membandingkannya dengan Bt komersial dan insektisida kimia. Penelitian dilakukan secara eksperimental menggunakan Rancangan Acak Kelompok (RAK) dengan empat perlakuan dan lima ulangan, menggunakan larva instar tiga. Data dianalisis menggunakan uji Kruskal-Wallis karena tidak memenuhi asumsi normalitas, kemudian dilanjutkan dengan uji post-hoc Dunn’s Test. Hasil penelitian menunjukkan adanya perbedaan yang signifikan antar perlakuan terhadap mortalitas larva (p = 0,004). Perlakuan Bt isolat BT-RG01 menunjukkan perbedaan signifikan dibandingkan kontrol (p = 0,004) dan Bt komersial (p = 0,040), namun tidak berbeda signifikan dibandingkan insektisida kimia. Mekanisme kerja Bt diketahui melalui toksin kristal (δ-endotoksin) yang merusak sel epitel usus larva sehingga menyebabkan kelumpuhan dan kematian. Dapat disimpulkan bahwa Bacillus thuringiensis isolat BTRG01 memiliki efektivitas tinggi sebagai agen biokontrol dan berpotensi menjadi alternatif pengendalian hama Helicoverpa armigera yang ramah lingkungan pada tanaman jagung