Anggrek macan (Grammatophyllum scriptum) adalah salah satu spesies anggrek yang menghadapi ancaman serius dari perburuan tak terkendali dan kerusakan habitat. Upaya budidaya anggrek macan secara in vitro dengan modifikasi pada media kultur dilakukan agar diperoleh bibit dalam jumlah banyak dengan waktu yang relatif singkat. Penelitian ini dilakukan untuk menjelaskan pengaruh penambahan pepton ikan selar kuning (Selaroides leptolepis) dengan taraf konsentrasi berbeda terhadap pertumbuhan planlet anggrek macan (G. scriptum) secara in vitro dan untuk menganalisis konsentrasi pepton ikan selar kuning (S. leptolepis) yang dapat memberikan pengaruh terbaik terhadap pertumbuhan planlet anggrek macan (G. scriptum). Desain yang digunakan adalah Rancangan Acak Lengkap (RAL) pada perlakuan penambahan pepton ikan selar kuning (S. leptolepis) 0 gr/L (A), 1 gr/L (B), 2 gr/L (C), 3 gr/L (D) dan 4 gr/L (E) dengan 5 kali ulangan. Penambahan pepton ikan selar kuning (S. leptolepis) memberikan pengaruh secara nyata pada pertumbuhan daun planlet anggrek macan (G. scriptum) berdasarkan hasil uji Anova pada tingkat kepercayaan 95%. Konsentrasi penambahan pepton ikan selar kuning (S. leptolepis) yang memberikan pengaruh terbaik pada peningkatan jumlah daun (rata-rata 1,56 helai) planlet anggrek macan (G. scriptum) secara in vitro adalah 3 g/L VW berdasarkan uji lanjut BNJ pada taraf kepercayaan 95%.