Salmonella sp. merupakan bakteri yang dapat menyebabkan penyakit Salmonellosis pada ayam broiler. Timbulnya infeksi Salmonella sp. pada ayam dikarenakan sistem pemeliharaan peternakan yang kurang diperhatikan dalam menjaga kebersihan sekitar lingkungan kandang. Oleh karena itu, biosecurity dalam peternakan perlu diterapkan dengan baik untuk meminimalkan cemaran mikroba. Salah satu sumber penularan mikroba adalah feses. Feses ayam dapat menjadi sumber penularan Salmonella sp. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui apakah terdapat bakteri Salmonella sp. di lingkungan peternakan ayam broiler di Kabupaten Klaten dan jika terdapat sampel yang positif maka akan dilanjutkan dengan uji biokimia untuk mengetahui karakteristik bokimia bakteri Salmonella sp. yang telah diisolasi. Pengambilan sampel feses dilakukan secara purposive sampling. Sampel diambil dari 2 peternakan tradisional dan 2 peternakan modern di Kabupaten Klaten. Hasil pengujian dari kedelapan sampel semuanya dinyatakan hasil negatif Salmonella sp.