Perkembangan suatu tanaman dipengaruhi oleh beberapa faktor, salah satunya adalah adanya Organisme Pengganggu Tanaman (OPT). Salah satu jenis OPT yang sering dijumpai adalah gulma bayam duri (Amaranthus spinosus L.). Upaya pengendalian gulma bayam duri umumnya masih menggunakan herbisida berbahan kimia yang berdampak negatif bagi lingkungan. Oleh karena itu, diperlukan alternatif lain dalam mengendalikan gulma bayam duri yaitu dengan menggunakan bioherbisida. Daun pepaya (Carica papaya L.) adalah salah satu tanaman dengan kandungan senyawa metabolit sekunder yang berpotensi sebagai bioherbisida. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui efektivitas ekstrak daun pepaya muda dan dewasa sebagai bioherbisida dalam mengendalikan gulma bayam duri. Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah RAK dengan 2 faktor perlakuan, yaitu umur daun (daun pepaya muda dan dewasa) serta konsentrasi (0%, 35%, 70%, 100%) dan dilakukan 3 kali pengulangan dengan parameter pengamatan meliputi tinggi tanaman, jumlah helaian daun, berat basah dan berat kering tanaman, serta fitotoksisitas tanaman bayam duri. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak daun pepaya dewasa dengan konsentrasi 100% paling efektif dalam menghambat pertumbuhan gulma bayam duri dengan rata-rata laju pertumbuhan 0,53 cm karena jumlah kandungan senyawa metabolit sekunder yang dimilikinya