Meningkatnya kebutuhan energi mendorong pengembangan sumber energi terbarukan seperti bioetanol dari biomassa. Bioetanol, energi alternatif berbasis selulosa, dapat diproduksi dari kayu jati yang melimpah di Indonesia. Limbah serbuk kayu jati dari industri dan mebel seringkali tidak dimanfaatkan, sehingga jumlahnya meningkat. Penelitian ini bertujuan menguji karakteristik bioetanol dari limbah serbuk kayu jati melalui tahapan: 1) preparasi limbah, 2) ekstraksi selulosa, 3) pembuatan bioetanol, 4) pengukuran kadar etanol, dan 5) uji karakteristik bioetanol. Uji karakteristik mencakup: 1) kadar etanol, 2) kadar air, 3) densitas, 4) specific gravity dan API gravity, serta 5) nilai kalor. Hasil penelitian menunjukkan bioetanol mendekati standar mutu dengan densitas dan specific gravity 0,8825 g/mL pada ragi 9 gram dengan fermentasi 2 hari. Nilai kalor mencapai 429,14 kkal/kg pada ragi 9 gram dengan fermentasi 2 hari. Kadar etanol tertinggi sebesar 1,423% dan kadar air terendah sebesar 53,26% diperoleh pada fermentasi 2 hari.