Salah satu tantangan dalam mempersiapkan siswa sebagai generasi unggul adalah keterampilan berpikir kritis. Sistem pendidikan di Indonesia masih fokus pada penyampaian informasi daripada perkembangan keterampilan berpikir kritis siswa sehingga diperlukan inovasi dalam pembelajaran. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kelayakan dari pengembangan petunjuk praktikum biologi berbasis model Discovery Based Unity of Sciences (DBUS) untuk memberdayakan keterampilan berpikir kritis siswa kelas XI SMA. Jenis penelitian yang digunakan adalah penelitian pengembangan (Research and Development) dengan model 4D (Define, Design, Develop, Disseminate) yang digagas oleh Thiagarajan et al pada 1974. Petunjuk praktikum biologi berbasis Discovery Based Unity of Sciences (DBUS) untuk memberdayakan keterampilan berpikir kritis siswa kelas XI SMA termasuk kategori sangat layak ditinjau berdasarkan nilai 77% dari ahli media, 91% dari ahli materi, 97% dari ahli metodologi dan integrasi nilai Islam, 92% dari ahli berpikir kritis, 96% dari guru, serta 88% dari uji keterbacaan dan respon siswa.