Tanaman kitolod (Hippobroma longiflora (L.) G. Don) diketahui mengandung berbagai senyawa bioaktif seperti alkaloid, flavonoid, tanin, dan saponin yang berpotensi sebagai agen antikanker. Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi aktivitas toksisitas ekstrak polar daun kitolod menggunakan metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT) sebagai uji awal potensi sitotoksik. Ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi menggunakan pelarut etanol dan metanol. Uji fitokimia menunjukkan adanya kandungan alkaloid, flavonoid, tanin, dan saponin pada kedua jenis ekstrak. Uji toksisitas dilakukan terhadap larva Artemia salina pada berbagai konsentrasi (10, 50, 100, 250, dan 500 ppm). Hasil menunjukkan bahwa ekstrak etanol memiliki nilai LC₅₀ sebesar 219.5 ppm, sedangkan ekstrak etanol sebesar 280.2 ppm, yang keduanya berada dalam kategori cukup toksik berdasarkan kriteria Meyer. Temuan ini menunjukkan bahwa ekstrak polar daun kitolod memiliki aktivitas sitotoksik sedang dan berpotensi dikembangkan sebagai agen ko-kemoterapi dalam pengobatan kanker berbasis herbal.