Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui ada atau tidaknya perbedaan antara motivasi belajar bioogi siswa kelompok peminatan dan kelompok lintas minat di SMA Negeri 13 Semarang. Penelitian ini merupakan penelitian kuantitatif. Teknik pengumpulan data yang digunakan adalah angket atau kuisioner. Angket digunakan untuk mengetahui motivasi belajar siswa. Populasi dalam penelitian ini adalah seluruh siswa kelas XI MIPA dan IIS SMA Negeri 13 Semarang. Sampel dalam penelitian ini diambil dengan teknik purosive sampling , sampel yang digunakan adalah kelas XI MIPA 2 dan XI IIS 2.
Teknik analisis yang digunakan adalah rumus t-test untuk mencari ada tidaknya perbedaan motivasi belajar biologi siswa kelompok peminatan dan kelompok lintas minat. Variabel X1 adalah motivasi belajar biologi siswa kelompok peminatan dengan nilai rata-rata yaitu 116 dan interval antara 112-119 berada dalam kategori baik. Motivasi belajar biologi kelompok lintas minat (X2) memiliki rata-rata 106 berada dalam interval 103-109 dan berada dalam kategori baik.
Hasil analisis uji hipotesis diketahui bahwa terdapat perbedaan signifikan anatara variabel X1 dan variabel X2, hal ini ditunjukkan dari nilai thitung = 5,291 hasil tersebut kemudian diinterpretasikan dengan ttabel dimana derakat kebebasan (dk) = n1+ n2 – 2 dengan taraf signifikansi 5% sebesar 1,99 dan 1% sebesar 2,65. Hal tersebut menunjukkan thitung > ttabel, berarti Ha diterima dan Ho ditolak, yang berarti ada perbedaan antara motivasi belajar biologi siswa kelompok peminatan dan kelompok lintas minat di SMA Negeri 13 Semarang tahun ajaran 2016/2017.